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豬表皮生長因子(EGF)ELISA檢測試劑盒技術說明書
BS-4568 豬表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒
一、產品概述
本試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯免疫吸附技術,專用于定量檢測豬血清、血漿、組織勻漿液及細胞培養上清液中的表皮生長因子(EGF)含量?。產品僅供科研使用,適用于豬只生長調控、疾病模型研究等領域。
二、檢測原理
固相抗體包被?:將抗豬EGF單克隆抗體預包被于微孔板形成固相載體?
抗原抗體反應?:樣本中的EGF與固相抗體結合,再加入生物素標記的二抗形成夾心復合物?
酶聯顯色?:加入HRP標記的鏈霉親和素,催化TMB底物顯色,顏色深淺與樣本中EGF濃度呈正相關?
定量分析?:450nm波長測定吸光度,通過標準曲線計算濃度?
三、試劑盒組成
組分 規格 保存條件
預包被微孔板 96孔/板 2-8℃密封
標準品(凍干) 6管 -20℃
酶標二抗 6ml 2-8℃避光
顯色劑A/B液 各6ml 2-8℃避光
終止液 6ml 室溫
20×洗滌緩沖液 20ml 室溫
樣本稀釋液 6ml 2-8℃
說明書 1份 -
四、樣本處理
采集要求?:
血清/血漿:EDTA抗凝,靜置析出血清后離心(3000rpm×15min)
組織勻漿:按1:9加入生理鹽水研磨,離心取上清
細胞上清:1000rpm離心10分鐘去除雜質
保存條件?:
短期:2-8℃(≤3天)
長期:-20℃(避免反復凍融)?
五、操作步驟
標準品稀釋?:
用標準品稀釋液配制480pg/ml原液,按2倍梯度稀釋至0pg/ml?
稀釋序列:480→240→120→60→30→0pg/ml
加樣反應?:
每孔加入標準品/樣本50μl,空白孔不加
37℃孵育30分鐘,洗板5次?
酶聯反應?:
加入酶標二抗50μl,37℃孵育30分鐘
洗板后加入TMB顯色液,避光反應10分鐘?
終止測定?:
加入終止液50μl,30分鐘內測定450nm吸光度?
六、結果計算
以標準品濃度(pg/ml)為橫坐標,OD值為縱坐標繪制標準曲線
樣本濃度=標準曲線擬合值×樣本稀釋倍數(建議5倍稀釋)
七、性能參數
指標 參數
檢測范圍 7.8-500pg/ml?
靈敏度 2.51pg/ml?
批內精密度 CV<6.6%
批間精密度 CV<7.9%
回收率 91-109%
注:以上僅供參考,不作為實際數據,實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。 Elisa試劑盒
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